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光片掃描顯微鏡和熒光探針的應用
更新時(shí)間:2022-02-22
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光片掃描顯微鏡
不是簡(jiǎn)單成像的顯微鏡,而是可以用于在原子、分子尺度進(jìn)行加工和操作的工具。掃描探針顯微鏡的應用領(lǐng)域是寬廣的,無(wú)論是物理、化學(xué)、生物、醫學(xué)等基礎學(xué)科,還是材料、微電子等應用學(xué)科都有用武之地。
光片掃描顯微鏡的基本原理是基于量子隧道效應。當針尖和試樣面間距離足夠小時(shí)(<0.4nm),在針尖和試樣面間施加一偏置電壓,便會(huì )產(chǎn)生隧道效應,電子在針尖和試樣面之間流動(dòng),形成隧道電流。
鈣比率探針在溶液中均有熒光,測量時(shí)須洗去細胞外液探針,而進(jìn)入細胞后的探針其AM被分解后不能透出質(zhì)膜。由于這些探針要用紫外激發(fā)光作激發(fā)光源,會(huì )造成細胞的損傷,還會(huì )增加潛在的自發(fā)熒光,而且熒光發(fā)射峰波長(cháng)也較短,須提高發(fā)光強度,因而其使用受到一定的限制。
膜電位熒光探針根據其對膜電位變化反應速度的快慢分為快、慢兩類(lèi)探針,各類(lèi)均有10多種。DiBAC4(3)為常用的膜電位熒光探針,DiBAC4(3)為帶負電荷的陰離子慢反應染料。該探針本身無(wú)熒光,當進(jìn)入細胞與胞漿內的蛋白質(zhì)結合后才發(fā)出熒光,測量時(shí)要求細胞浸在熒光染料中。
細胞內活性氧基活性氧可影響細胞代謝,與蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等發(fā)生反應,有些反應是有害的,因此測量活性氧在毒理學(xué)研究中有一定的意義。根據檢測活性氧的不同可選擇不同的熒光探針。
由于某些毒性物質(zhì)尤其是促癌物可影響縫隙連接介導的物質(zhì)運輸,因此該方法也可用于鑒別對縫隙連接作用有潛在毒性的化學(xué)物質(zhì)。
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