自動(dòng)核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸的提取工作的儀器，核酸提取儀分為兩類(lèi)：一類(lèi)是大型的自動(dòng)化的，一般稱(chēng)為自動(dòng)液體工作站；另一類(lèi)是小型自動(dòng)核酸提取儀，利用封裝好的配套試劑自動(dòng)完成提取純化過(guò)程。

 

　　它是以納米生物磁珠為載體的一種新型核酸提取技術(shù)，核酸分子可與磁珠表面的硅羥基發(fā)生特異性識別與結合，在外部磁場(chǎng)的作用下發(fā)生聚集或分散，擺脫傳統核酸提取過(guò)程中離心、抽取上清液等手工操作流程，從而實(shí)現核酸的自動(dòng)化提取。廣泛應用于臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。


  

 

磁珠法核酸提取一般包括裂解、結合、洗滌、洗脫四個(gè)主要步驟，每一步驟又可由多種不同的方法單獨或聯(lián)合實(shí)現，其中裂解環(huán)節是決定提取之質(zhì)量的重中之重，經(jīng)常也會(huì )有老師問(wèn)到應該如何對裂解液進(jìn)行優(yōu)化。那么，我們就來(lái)分析一下配置裂解液經(jīng)常用的試劑及其作用原理。

 

　　1、鹽酸胍、尿素

 

　　鹽酸胍在濃度為4－8mol時(shí)可斷裂氫鍵，有兩種可能機制：1、變性蛋白和鹽酸胍、尿素優(yōu)先結合，形成變性蛋白－變性劑復合物，當復合物被除去，引起N－D反應平衡向右移動(dòng)，隨著(zhù)變性劑濃度增加，天然狀態(tài)的蛋白不斷轉變?yōu)閺秃衔?，導致蛋白質(zhì)*變性；2、鹽酸胍、尿素對氨基酸具有增溶作用，能形成氫鍵，當濃度高時(shí)，能破壞水的氫鍵結構，成為非極性殘基的較好溶劑，使蛋白質(zhì)內部的疏水殘基伸展和溶解性加強，鹽酸胍、尿素引起的蛋白變性往往是不可逆的。

 

　　2、異硫氰酸胍

 

　　蛋白質(zhì)變性劑，能迅速溶解蛋白質(zhì)，導致細胞結構破碎，核蛋白由于其二級結構的破壞消失而迅速與核酸分離。在通常使用的蛋白質(zhì)變性劑中作用強的是異硫氰酸胍，它們可以使多數蛋白質(zhì)轉換成一種隨機的卷曲狀態(tài)。含有強的陰離子和陽(yáng)離子基團，它們可以形成較強的氫鍵。在還原劑存在的情況下，異硫氰酸胍可以斷裂氫鍵，而去垢劑，如SDS存在的情況下，可以破壞疏水作用。